Funghi veloci

1) In dotazione:
- Sacchetto microfiltrato con substrato di crescita e porta di iniezione

- Fiala per coltura liquida MycoMate

- Tamponi alcolici sterili

- Vassoio di fruttificazione

- Sacchetto di vermiculite

- Sacco fruttifero microfiltrato

2) Sono necessari

-Fiamma a gas (va bene un accendino tipo torcia)

- Ciotola pulita per la miscelazione

- Nebulizzatore manuale

- Le spore da inoculare nel kit.

- Mani pulite e un'area pulita in cui lavorare.

3) Inoculazione:

Esistono due opzioni per inoculare (iniettare) il kit di funghi Fast Fungi:

A. Spore:

È possibile iniettare le spore direttamente nel substrato di coltivazione. Questa opzione è un po' meno laboriosa, ma richiede più tempo per la fruttificazione del kit e non sempre germinano abbastanza spore. Se si sceglie questa opzione, passare direttamente alla fase 1 (vedi sotto).

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B. Fiala per coltura liquida:

Per una colonizzazione più rapida e una resa maggiore, è consigliabile inoculare e colonizzare prima una fiala di coltura liquida e poi iniettare la coltura liquida nel sacchetto del substrato di coltivazione. Le spore produttrici di tartufo possono richiedere più tempo per germinare sui cereali rispetto alle spore produttrici di funghi, quindi la coltura liquida può servire come scorciatoia. Se questa è l'opzione scelta, seguire i passaggi da B1 a B10, altrimenti passare direttamente al punto 1).

B1) Se il terreno di coltura liquido è refrigerato, toglierlo dal frigorifero e conservarlo a temperatura ambiente per 24 ore prima dell'uso.

B2) Lavare accuratamente le mani (l'uso di sapone antibatterico è facoltativo). Asciugare con un asciugamano pulito (ad es. carta assorbente).

B3) Rimuovere la fiala dalla busta e posizionarla su un tavolo pulito in un'area pulita e priva di detriti.

B4) Applicare l'alcol sulla porta di iniezione della fiala per coltura liquida e su qualsiasi altro sito destinato all'iniezione (ad es. fiala di spore o fiala per coltura liquida). Utilizzare un tampone pulito per ogni prodotto da bagnare, al fine di ridurre la contaminazione reciproca. Non espirare direttamente sui siti di iniezione.

B5) Estrarre la siringa e l'ago dalla busta. Rimuovere il coperchio di plastica che protegge l'ago (girare in senso orario e tirare).

L'ago non deve entrare in contatto con alcun oggetto, altrimenti deve essere risterilizzato. Se si utilizza una siringa di un altro fornitore, anche questa deve essere sterilizzata.

Gli aghi possono essere sterilizzati con una fiamma. È auspicabile che l'ago sia caldo, facendo attenzione a non surriscaldare e a non fondere l'area in cui l'ago è attaccato alla plastica. Lasciare sempre raffreddare l'ago prima di iniettare.

B6) Se si utilizza una fiala per coltura liquida di spore o colonie, agitare vigorosamente per miscelare la sospensione. Tenere la fiala inclinata, iniettare con la siringa e prelevare la quantità di sospensione desiderata.

B7) Iniettare alcune gocce di sospensione colturale (cioè il liquido colonizzato dalla fiala di coltura) o tra alcune gocce e 1 ml di sospensione di spore (a seconda della densità della soluzione di spore) nella fiala di coltura liquida. Estrarre l'ago molto lentamente, altrimenti la pressione potrebbe far fuoriuscire parte del liquido, il che non costituisce un problema.

B8) Pulire la porta di iniezione della fiala per coltura liquida con un tampone pulito inumidito con alcol; lasciare asciugare e conservare in posizione verticale in un sacchetto di plastica ermetico.

B9) Agitare vigorosamente la fiala una volta al giorno per dieci secondi e conservarla al riparo dalla luce solare. Incubare le specie di funghi alla temperatura appropriata (generalmente 23-27°C). Una temperatura più bassa ritarda la germinazione e la colonizzazione delle spore. Tuttavia, una temperatura troppo elevata (superiore a 27°C) aumenta il rischio di contaminazione.

Nota: i requisiti di temperatura dipendono dalla specie.

B10) La crescita è simile sia con le spore che con la coltura liquida. Tuttavia, la crescita con le spore richiede più tempo rispetto alla coltura liquida.

Sospensione di spore: le spore impiegano generalmente 24-72 ore per germinare ed entro 3-7 giorni si dovrebbe osservare la colonizzazione del terreno liquido nei due terzi inferiori della fiala.

Nota: le fiale di coltura liquida MycoMate® richiedono pochissime spore per crescere.

Coltura liquida: la crescita è evidente entro 24 ore dal trasferimento del micelio da una fiala di coltura liquida colonizzata a fiale di coltura liquida fresche. Le fiale fresche sono generalmente colonizzate dopo alcuni giorni (a seconda della specie, del ceppo e della temperatura).

L'osservazione è più efficace se la fiala viene tenuta accuratamente in controluce, evitando di scuoterla. Il sedimento nel terreno di coltura può agitarsi se non si fa abbastanza attenzione, rendendo più difficile l'identificazione della crescita (non è un problema, perché il sedimento si depositerà di nuovo sul fondo dopo un po'). Quando si solleva la fiala, i fili bianchi del micelio (fungo) galleggiano in superficie. Dovrebbe esserci una piccola nuvolosità intorno al micelio, ma l'intera fiala non dovrebbe essere opaca. L'area intorno all'intorbidamento del micelio dovrebbe essere ragionevolmente chiara. Se la fiala viene sollevata lentamente e appare completamente opaca, è possibile che sia contaminata. Lasciare riposare la fiala indisturbata per alcune ore e ricontrollare per escludere che siano stati i sedimenti del fondo a oscurare la fiala. Può essere utilizzato non appena si verifica una crescita sana o dopo una o due settimane quando la fiala mostra una maggiore colonizzazione.

Nota: quando uno o due terzi della fiala sono stati colonizzati, è opportuno utilizzarla o conservarla in frigorifero per un uso successivo (vedi sotto).

B11) Una volta completata la colonizzazione, la fiala può essere utilizzata per inoculare altre fiale di coltura liquida MycoMate® (ripetendo i passaggi da B1 a B10), kit di funghi commestibili MycoMate® o sclerozi (ripetendo i passaggi da B1 a B6).

1 ) Lavare accuratamente le mani (l'uso di sapone antibatterico è facoltativo). Asciugare con un asciugamano pulito (ad es. carta assorbente).

2 ) Tenere la porta di iniezione del sacchetto di substrato con una mano, sollevare le due linguette di plastica con l'altra mano e strappare con cautela il coperchio di plastica che protegge la porta di iniezione. Applicare l'alcol con un tampone pulito e lasciare asciugare.

3 ) Estrarre la siringa e l'ago dalla busta, rimuovere il coperchio di plastica che protegge l'ago (girare in senso orario). Non lasciare che l'ago venga a contatto con alcun oggetto, altrimenti sarà necessario risterilizzarlo.

Le acque possono essere sterilizzate con una fiamma, è auspicabile che l'ago sia rovente, facendo attenzione a non surriscaldare e a non fondere la zona in cui l'ago è attaccato alla plastica; lasciare raffreddare l'ago prima di iniettarlo. Evitare di espirare sull'ago o sull'area di iniezione.

4 ) Spingere l'ago della siringa attraverso la porta di iniezione della sacca del substrato.

Spore: utilizzare la porta di iniezione per guidare l'ago e iniettare da 1 a 2 ml in ogni angolo e parallelamente ai lati del sacchetto di substrato. Includere diverse gocce sul substrato stesso. Più uniforme è l'iniezione nel substrato, più rapida sarà la colonizzazione.

Fiala per coltura liquida: utilizzare la porta di iniezione per guidare l'ago e iniettare 1 o 2 gocce in ogni angolo e parallelamente ai lati del sacchetto del substrato. Lasciare gocciolare la soluzione sui lati del sacchetto di substrato. Includere diverse gocce sul substrato stesso. Ogni goccia di coltura rappresenta un punto di crescita, quindi più uniforme è l'iniezione nel substrato, più rapida sarà la colonizzazione.

4) Colonizzazione:

Incubare il sacchetto al buio e alla temperatura appropriata, tra 23 e 27°C.

Spore: nel giro di alcuni giorni o due settimane le spore germineranno (piccoli grumi dall'aspetto cotonoso) e il fungo colonizzerà il sacchetto per diverse settimane. Se la germinazione non è distribuita uniformemente in tutto il sacchetto nei successivi 14-22 giorni, è possibile accelerare la colonizzazione mescolando con cura il contenuto del sacchetto. Fatelo solo una volta, in modo che i funghi possano completare la colonizzazione.

Coltura liquida: nel giro di 24-72 ore il fungo nasce e in una o due settimane colonizza il substrato, a seconda della specie e della varietà.

Contaminazione: se la "torta" di funghi (le germinazioni) assume un colore diverso dal bianco, controllate la specie che state coltivando per verificare se è normale. I contaminanti più comuni che si possono trovare sono i batteri (senza crescita fungina, aspetto lattiginoso) e le muffe verdi.

NON APRIRE MAI UN SACCHETTO CONTAMINATO!

Quando sembra che il fungo abbia colonizzato completamente il substrato, aspettate altri 5-7 giorni per assicurarvi che anche l'interno del substrato sia completamente colonizzato. La "torta" di funghi è quindi pronta per essere messa a bagno e fruttificata.

5) Ammollo:

L'ammollo reidrata la "torta" di funghi e ne aumenta notevolmente la resa.

1. Lavare accuratamente le mani (l'uso di sapone antibatterico è facoltativo). Asciugare con un asciugamano pulito (ad es. carta assorbente).

2. Rimuovere con cura la "torta" di funghi dal sacchetto di substrato e metterla in un contenitore pulito (ad esempio, una ciotola, un contenitore di plastica ermetico).

3. Il metodo migliore è quello di mettere la "torta" di funghi in un sacchetto di plastica ermetico riempito d'acqua fino a sommergerla completamente. Spremere l'aria in eccesso dal sacchetto fino a riempirlo e riporlo nel contenitore. Lo stesso si può ottenere riempiendo un contenitore con acqua pulita (preferibilmente acqua distillata) fino a sommergere completamente la "torta" di funghi. È necessario posizionare un oggetto leggero sopra la "torta" per mantenerla sommersa.

4. Lasciare il contenitore sigillato in frigorifero (mai in freezer!) per una notte (o circa 12 ore). Dopo che sono cresciuti diversi gruppi di funghi,

la "torta" di funghi completamente disidratata può essere messa a bagno per un massimo di 24 ore.

6) Fruttificazione:

1. Lavare accuratamente le mani (l'uso di sapone antibatterico è facoltativo). Asciugare con un asciugamano pulito (ad es. carta assorbente).

2. Versare la vermiculite in una ciotola pulita.

3. Aggiungere 100 ml di acqua alla vermiculite, mescolando bene. Mescolare per alcuni minuti fino a quando la vermiculite non sarà completamente bagnata.

4. Distribuire la vermiculite in modo uniforme sul fondo del vassoio di fruttificazione.

5. Togliere la "torta" di funghi dal frigorifero e sciacquare bene sotto l'acqua corrente (e fredda).

6. Posizionare il panetto di funghi sulla vermiculite al centro del vassoio di fruttificazione.

7. Posizionare il vassoio nel sacchetto per la fruttificazione e spruzzare più volte i lati del sacchetto con acqua. Piegare più volte il lembo superiore del sacchetto e chiuderlo con una graffetta o una molletta.

8. Posizionare il sacchetto alla luce solare filtrata (non diretta) o sotto luci fluorescenti. Mantenere una temperatura adeguata (di solito 22-25°C). La fruttificazione è migliore se l'interno del sacchetto viene mantenuto umido spruzzando leggermente acqua con un flacone spray una o due volte al giorno, secondo le necessità. Evitate di spruzzare troppa acqua direttamente sui funghi (una leggera nebulizzazione va bene).

9. Nel giro di alcuni giorni o due settimane si può notare la comparsa dei funghi. Si possono raccogliere quando sono maturi, torcendo con attenzione la base del gambo e tirando il fungo verso l'alto.

10. Quando ogni ciuffo di funghi è completamente cresciuto, prendete un coltello o una forchetta pulita e rimuovete con cura tutti i funghi abortiti dalla "torta". La torta deve essere sciacquata accuratamente sotto acqua corrente fredda e pulita e messa nuovamente a bagno per ripristinare l'umidità (ripetere i passaggi dal n. 1 al n. 4 nella sezione sull'ammollo). Distribuire la vermiculite usata sul vassoio di fruttificazione e spruzzare più volte con acqua per reidratarla. Dopo l'ammollo, la "torta" deve essere rimessa al centro del vassoio all'interno del sacchetto di fruttificazione e il processo di fruttificazione deve essere ripetuto.

11. Mantenere umidi i lati del sacchetto di fruttificazione e immergere la "torta" di funghi dopo la raccolta di ciascun gruppo di funghi. È lecito aspettarsi tre o più grappoli.

ALTERNATIVA:

OPZIONI DI FRUTTIFICAZIONE E SPERIMENTAZIONE:

Bassa manutenzione:

È possibile scegliere di far fruttificare i funghi senza rimuovere il substrato dal sacchetto in cui sono cresciuti. Anche se non tutte, molte specie e varietà di funghi possono fruttificare in questo modo. Dopo che la torta è stata completamente colonizzata, mettete circa 1-1,5 cm di vermiculite umida (non bagnata) direttamente sopra la "torta" di funghi nel sacchetto più piccolo in cui è cresciuta. Chiudere il sacchetto con il filtro, incubare a una temperatura adeguata sotto la luce solare filtrata (non diretta) o la luce fluorescente e attendere la comparsa dei funghi. Dopo la raccolta, spruzzare più volte la superficie della vermiculite e chiudere il sacchetto. Attendere il successivo gruppo di funghi, raccogliere e ripetere l'operazione. L'ammollo tra un grappolo e l'altro può spesso aumentare la resa di questa tecnica.

Non richiede manutenzione:

In alternativa, è possibile far fruttificare i funghi nei sacchi in cui sono cresciuti originariamente i "panetti", senza essere coperti da alcun tipo di contenitore. Anche se non tutte, molte specie e varietà di funghi possono essere fruttificate in questo modo.

Dopo che la "torta" è stata completamente colonizzata, mettetela sotto la luce solare filtrata (non diretta) o la luce fluorescente e mantenete una temperatura adatta alla fruttificazione. Dopo aver raccolto ogni grappolo di funghi, è sufficiente richiudere il sacchetto e attendere il grappolo successivo. L'ammollo tra un grappolo e l'altro può spesso aumentare la resa di questa tecnica.

Invasatura:

Aggiungere molto lentamente +/-100 ml di acqua alla vermiculite, assicurandosi di mescolare bene. La vermiculite deve essere uniformemente inumidita. Ciò significa che potete stringere forte la vermiculite nella mano e solo poche gocce d'acqua cadranno attraverso le dita. Spargetene metà in modo uniforme sul vassoio di fruttificazione. Mettete da parte l'altra metà.

Dividere la "torta" di funghi colonizzati in piccoli pezzi o tagliarla con un coltello pulito in cubetti di 2-3 cm. Distribuire uniformemente sul fondo del vassoio di raccolta. Con un cucchiaio e/o con le mani pulite, spargere con cura la vermiculite su tutta la superficie dei funghi (coprendoli per circa 0,5-1 cm di profondità). Non compattare il substrato. Posizionare il vassoio nel sacco fruttifero microfiltrato, spruzzare leggermente con acqua e chiudere bene con una graffetta o una molletta. Mantenete umida (non bagnata) la superficie del terriccio di vermiculite spruzzando quotidianamente (1 o 2 volte al giorno). Quando iniziate a vedere la formazione di piccoli funghi, fate attenzione a non spruzzare troppo il terriccio. Aspettate che il gruppo di funghi sia raccolto e poi spruzzate altra acqua nel corso di alcuni giorni per reidratare la vermiculite.