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                                                                                                                                                                                                 INSTRUÇÕES DE USO TUBOS CULTURA LÍQUIDO



1) Incluindo:

- Liquid Cultura Vial Mycomate ®

- Compressas estéreis com álcool

- Seringa estéril e agulha de calibre 18 - frasco de cultura líquida

 

2) Você vai precisar de:

- Chama de gás ( butano um "tipo de tocha " funciona bem )

- Os esporos que você quer injetar no frasco de cultura líquida .

- Mãos área limpa e arrumada para trabalhar

 

3) Sementeira :

 

A injecção de cultura líquido e colonização :

1) Se o meio de cultura líquido é resfriado , retire da geladeira e armazenar em temperatura ambiente 24 horas antes do uso.

2) Lave bem as mãos (use sabão antibacteriano é opcional) . Seque com uma toalha limpa (por exemplo, com toalhas de papel ) .

3) Retire o frasco da embalagem e coloque sobre uma mesa em uma área limpa limpo, livre de detritos.

4) porta de injeção Swab e frasco de cultura líquida destinada para outro lugar para ser injetado ( Vial por exemplo, de esporos ou frasco de cultura líquida ) . Usar um cotonete para cada produto a ser molhados, de forma a reduzir a contaminação cruzada . Não expira diretamente nos locais de injecção.

5) Retire a seringa ea agulha do saco. Remova a tampa plástica que protege a agulha (rodar no sentido horário e puxe- relógio).

Não deixe que a agulha tocar em qualquer objeto , caso contrário, você terá que ser esterilizado . Quando se utiliza uma seringa de qualquer outro fornecedor , deve ser primeiro esterilizado.

As agulhas podem ser esterilizados com uma chama. É desejável que a agulha é encarnado, tomando cuidado para não sobreaquecer e derreter a área onde a agulha está ligado ao plástico. Sempre deixe a agulha legal antes de injetar . (Veja a foto a ) .

 

6) Se você estiver usando um frasco de esporos de cultura líquido ou colonizados, agitar vigorosamente para misturar a suspensão. Segurar o frasco a um ângulo, injectar com a seringa, retirar a quantidade desejada de suspensão. (Veja a foto b).

  7) Injectar várias gotas de suspensão de cultura (isto é colonizado frasco de cultura líquido) ou de várias gotas a 1 ml de suspensão de esporos (dependendo da densidade da solução de esporos) no frasco de cultura líquida. Remover a agulha muito lentamente, caso contrário, a pressão pode fazer com que uma parte do líquido a ser pulverizado do lado de fora, o que não é problema. (Veja a foto c).

8) Limpe a injeção porta frasco de cultura líquida com um cotonete embebido em álcool, deixe secar e guardar na posição vertical em saco plástico hermeticamente fechado.

9) Agite frasco uma vez por dia durante dez segundos e armazenados longe da luz solar. As espécies de fungos incubar a uma temperatura adequada (geralmente de 23 ° a 27 ° C). Uma temperatura inferior atrasa o tempo de germinação de esporos e da colonização. No entanto, uma temperatura demasiado elevada (acima de 27 ° C), aumenta o risco de contaminação. (Veja foto d).

 

Nota: Os requisitos de temperatura depende da espécie .

10) O crescimento é semelhante tanto em esporos e cultura líquida . No entanto , o crescimento de esporos demora mais do que com o último.

Suspensão de esporos : Os esporos geralmente levam entre 24 e 72 horas para germinar , e entre 3 e 7 dias, você deve observar a colonização do meio líquido a crescer nos dois terços inferiores do frasco.

Nota: Os frascos de cultura líquido Mycomate ® requerem muito poucos esporos para crescer.

Cultura líquido : O crescimento é evidente dentro de 24 horas após a transferência do micélio de um colonizado frasco de cultura líquida para novos frascos de cultura líquido . Frascos frescos são colonizados depois de vários dias ( dependendo da espécie , a tensão e temperatura ) .

A observação é mais eficaz quando cuidadosamente segurando o frasco contra a luz , evitando shake. O pellet do meio de cultura pode ser mexido se não for cuidadoso o suficiente , tornando-se difícil identificar o crescimento ( isto é ok, porque o tempo vai se contentar novamente em segundo plano ) . Fios brancos de micélio ( fungos ) irá flutuar à superfície como você levantar o frasco. Deve ser uma nuvem pequena em torno do micélio , mas todo o frasco não deve ser opaco . A área ao redor dos nebulosidade de micélio deve ser bastante transparente. Se o frasco for levantado lentamente, e contudo completamente opaco pode ser contaminado . Deixe o frasco em repouso durante várias horas e verifique novamente a questão dos sedimentos no fundo nublando o frasco . Isto pode ser utilizado logo que o crescimento saudável ou depois de uma ou duas semanas, quando a estrada mostra maior colonização.

Nota: Quando 1-2 terços da estrada têm sido colonizado deve ser utilizado ou armazenado sob refrigeração para uso posterior ( ver abaixo).

11) Quando a colonização se completar o frasco pode ser utilizada para inocular outro Mycomate ® frascos líquido de cultura ( repetindo os passos de 1 a 10 ) , Mycomate ® Kits comestíveis cogumelo Escleródios ( repetindo os passos 1-6 )

4 ) Armazenamento:

Líquido Cultura frascos Mycomate ® pode ser usado para armazenamento de culturas de curto e longo prazo, incluindo variedades multiespora , isolada ou clonado. Um frasco de cultura líquida, pode ser usado para produzir milhares. Uma vez que o frasco foi inoculado , e o micélio coloniza 30 % e 65 % do meio líquido, ele pode ser armazenado sob refrigeração (2 ° a 8 ° C) durante vários meses ( ou mais) , sem por isso efeitos nocivo. Armazenar na vertical em dois ou três sacos de plástico hermeticamente fechados . Não é necessário agitar durante este período de colheitas .

Economize tempo valioso : Quando a cultura líquido é necessária , basta remover o frasco da geladeira e usar.